一、聚酰胺薄層層析分離原理:
用于薄層層析分離的聚酰胺基團有兩類:錦綸66(尼龍)和錦綸6,這兩類材料中都含有大量的酰胺基團,故統(tǒng)稱為聚酰胺。聚酰胺以其-CO-或-NH-與極性化合物的-OH或=O之間形成氫鍵,從而發(fā)生吸附作用。不同物質(zhì)與聚酰胺之間形成氫鍵的能力不同。在聚酰胺薄膜上做層析分離時,流動相從薄膜表面流過,被分離物質(zhì)在溶劑和薄膜之間按分配系數(shù)的大小發(fā)生不同速率的吸附與解吸過程,從而使混合物得到有序的分離。聚酰胺薄層層析分離常與離心機分離技術(shù)結(jié)合使用。
二、影響遷移率的主要因素:
1、成鍵基團數(shù)目越多,吸附力越大。
2、成鍵基團的位置影響氫鍵數(shù)目和強度。
3、芳香環(huán)和共雙鍵越多,成鍵越強。
4、被分離物質(zhì)分子內(nèi)氫鍵的形成可以削弱它與聚酰胺之間氫鍵的形成。
5、溶劑的影響。
三、聚酰胺薄層層析分離特點:
1、對極性化合物有特異的分辨能力。
2、靈敏度高。
3、操作方便,速度快。
4、樣點不擴散。
5、有熒光的物質(zhì)可用紫外燈檢出,不必噴顯色劑顯色。
四、聚酰胺薄層層析分離應(yīng)用:
可分離多種化合物,在蛋白質(zhì)或肽的N末端殘基分析中是比較理想的分離方法。