熒光成像技術(shù)在生物醫(yī)學領(lǐng)域起著舉足輕重的作用,它可以實現(xiàn)細胞、組織及動物層面的實時觀察,但在亞細胞或更小結(jié)構(gòu)的精細觀察上受限于衍射極限。近十幾年來,超分辨成像技術(shù)如STED,PALM,STORM等的發(fā)展打破了衍射極限的局限,為成像領(lǐng)域帶來了革命性的突破。
超分辨成像技術(shù)對探針的要求非常苛刻。目前,最常用的探針主要是具有光活化或光開關(guān)性質(zhì)的熒光蛋白、量子點以及有機熒光小分子。其中,熒光蛋白通常較大,發(fā)光較弱且光穩(wěn)定較差。量子點的制備修飾復(fù)雜,且含有的重金屬有毒和具有致癌性;趥鹘y(tǒng)有機發(fā)光材料的探針會發(fā)生聚集熒光猝滅和光漂白。因此,開發(fā)光穩(wěn)定性好、發(fā)光效率高、制備簡單、生物兼容性較好的探針是未來超分辨成像研究和實踐的主要目標,具有極大的挑戰(zhàn)性。
為了克服傳統(tǒng)有機發(fā)光分子在超分辨成像領(lǐng)域光穩(wěn)定性不好和聚集猝滅等不足,唐本忠院士及其團隊最近設(shè)計并合成了一系列新型光活化AIE探針,首次將AIE材料應(yīng)用于超分辨成像領(lǐng)域,表現(xiàn)出優(yōu)異的活細胞線粒體的超分辨成像性能。
他們巧妙地利用扭曲分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移效應(yīng)和芳香環(huán)旋轉(zhuǎn)耗能雙重作用,使AIE探針剛開始不發(fā)光,處于熒光“暗態(tài)”。當光激活后,該AIE探針會發(fā)生非傳統(tǒng)區(qū)域選擇性光致氧化關(guān)環(huán)反應(yīng)。根據(jù)分子內(nèi)旋轉(zhuǎn)受限機制,新形成的共價鍵會限制分子內(nèi)旋轉(zhuǎn),誘導(dǎo)高效發(fā)光,得到熒光“亮態(tài)”。這種高效發(fā)光“亮態(tài)”會被特定的光猝滅,使其又回到熒光“暗態(tài)”。不斷重復(fù)這個過程,實現(xiàn)被標記物的衍射極限以下的超分辨成像。由此,利用該特性,他們成功實現(xiàn)活細胞中線粒體的超分辨成像,并對線粒體融合分裂動力學進行了觀察研究,充分體現(xiàn)了該AIE探針在活細胞超分辨成像方面所具備的實際應(yīng)用價值。
相對于其它探針,該AIE探針具有以下顯著優(yōu)勢:高的光穩(wěn)定性帶來高的光活化產(chǎn)物產(chǎn)率;光活化產(chǎn)物具有高的發(fā)光效率,500 nm以上的長波長激發(fā)以及pH和環(huán)境穩(wěn)定;不需要硫醇或除氧劑的輔助,直接在生理條件下自發(fā)閃爍,實現(xiàn)活細胞內(nèi)超分辨成像。
這項研究充分體現(xiàn)AIE探針優(yōu)異的光穩(wěn)定性在超分辨成像應(yīng)用上的雙贏,結(jié)果發(fā)表在Advanced Materials(Adv. Mater. 2016, 28, 5064–507)雜志上。為將AIE應(yīng)用于超分辨成像領(lǐng)域邁出了開創(chuàng)性的一步,必將會激勵研究者設(shè)計出更亮、更光穩(wěn)定以及性能更好的超分辨成像AIE探針,對更精細地理解生物體系具有非常深遠的意義。
參考文獻:
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- 唐本忠院士團隊/南科大李凱教授課題組 ACS Nano:用于提高診療效果的“一體式”近紅外發(fā)光納米聚集體 2023-03-04
- 香港中文大學(深圳)唐本忠教授團隊 ACS Nano: 利用AIEgen對綠藻脂滴的熒光成像和流式篩選提高了一倍的油脂產(chǎn)量 2022-09-16