目前傳統(tǒng)的人工角膜存在與組織邊緣對合不齊,上皮化困難,上皮易脫落等問題,這是因?yàn)樗鼈兇蠖嗫紤]的是成分的仿生,而忽略了角膜結(jié)構(gòu)的仿生,結(jié)構(gòu)決定功能,一個(gè)好的角膜修復(fù)材料需兼具成分與結(jié)構(gòu)的仿生。普通的制備手段很難對患者的角膜曲率結(jié)構(gòu)進(jìn)行個(gè)性化定制,而3D打印可以很好的解決這個(gè)問題。且角膜曲率對組織功能的正常發(fā)揮有重要作用,如圓錐角膜的發(fā)生會(huì)導(dǎo)致上皮細(xì)胞異常,因此研究如何構(gòu)建曲率角膜修復(fù)材料和研究細(xì)胞在曲率環(huán)境中的生長行為對角膜修復(fù)有重要作用。
本研究針對目前人工角膜與組織邊緣對合不齊,上皮化困難,上皮易脫落等難題,通過3D打印技術(shù)構(gòu)建具有光滑表面的曲率角膜,突破了3D打印人工角膜易產(chǎn)生“臺階效應(yīng)”的限制。所制備的曲率角膜可誘導(dǎo)細(xì)胞排列,促進(jìn)上皮細(xì)胞黏附,加快角膜再上皮化進(jìn)程(3天)和基質(zhì)、神經(jīng)再生,具有巨大的臨床價(jià)值和前景。是團(tuán)隊(duì)近期關(guān)于角膜再生修復(fù)材料的最新進(jìn)展之一,近年來,團(tuán)隊(duì)一直致力于開發(fā)出適合臨床使用的角膜再生修復(fù)材料,在無縫線縫合角膜材料(Acta Biomaterialia, 2022, DOI:10,1016/j.actbio.2022.09.049),Micro RNA治療角膜上皮缺損(Bioactive Materials, 2022, Doi:10.1016/j.bioactmat.2022.07.011),高效率交聯(lián)劑、雙交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)提升材料力學(xué)性能(International Journal of Biological Macromolecules, 2021, Doi:10.1016/j.ijbiomac.2021.09.144; Acs Applied Polymer Materials, 2022, DOI:10.1021/acsapm.2c00472)等方面做出重大突破,有效解決了目前人工角膜不耐縫合、易溶解等問題,極大推動(dòng)了角膜領(lǐng)域的發(fā)展,為角膜盲患者重見光明帶來希望,增進(jìn)人民福祉。
圖1 3D打印角膜制備工藝優(yōu)化圖及角膜實(shí)物圖,溫度是影響打印表面是否出現(xiàn)“臺階效應(yīng)”的關(guān)鍵
圖2 曲率角膜具有調(diào)控RCECs細(xì)胞取向排列形態(tài)的功能,細(xì)胞傾向于沿著曲率經(jīng)線方向生長,且坡度的增加會(huì)使得細(xì)胞更加細(xì)長和對齊
圖3 曲率角膜能提高RCECs的黏附能力,促進(jìn)細(xì)胞核收縮和染色質(zhì)凝縮,與黏附和核相關(guān)的基因均比平面組高表達(dá),在黏附蛋白表達(dá)方面曲率角膜也具有優(yōu)勢
圖4 有限元分析曲率角膜不同坡度上RCECs的受力狀態(tài),坡度越陡的地方,細(xì)胞受到的剪切力越大,與角膜基底的牽引力越大,即細(xì)胞取向和極化程度增加,黏附力增大
圖6 曲率角膜長期在體促進(jìn)角膜基質(zhì)和神經(jīng)修復(fù)圖。通過長達(dá)180天的觀察,曲率角膜組基質(zhì)再生能力強(qiáng),角膜厚度恢復(fù),角膜透明,神經(jīng)再生,而對照組修復(fù)效果不理想,說明3D打印曲率角膜具有臨床應(yīng)用的前景
圖7 曲率角膜調(diào)控RCECs行為的機(jī)制圖,曲率通過整合素(integrin-based)信號通路增強(qiáng)細(xì)胞黏附
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