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  心力衰竭（HF）是一種臨床綜合征，HF患者在確診后一年和五年內(nèi)的死亡率分別約為20%和53%。約17%-45%的HF住院患者在入院一年內(nèi)死亡，只有不到一半的患者能夠存活五年以上。因此，早期診斷對(duì)于HF疾病的早期治療至關(guān)重要。腦利鈉肽或B型利鈉肽（BNP）是一種心臟神經(jīng)激素，是通過監(jiān)測(cè)心衰治療和預(yù)防心源性急性呼吸困難的發(fā)生來(lái)診斷心衰的最重要的心臟生物標(biāo)志物之一。健康個(gè)體血液中BNP 濃度極低，約為20 pg mL^?1，重度充血性心衰患者濃度升至約2 ng mL^?1。目前已開發(fā)的用于BNP檢測(cè)的方法很多，然而，由于早期心衰患者血液中BNP的含量很低，同時(shí)在體內(nèi)的半衰期很短（約22 min），目前大多數(shù)檢測(cè)方法不能滿足快速、準(zhǔn)確的要求。因此，開發(fā)一種快速、可靠、高靈敏度和高準(zhǔn)確度的BNP檢測(cè)方法具有重要的研究意義。

  抗體、RNA/DNA適配體等親和試劑由于具有特定的親和力和選擇性而被廣泛應(yīng)用于BNP的檢測(cè)，然而這些生物大分子存在價(jià)格昂貴、不穩(wěn)定、易失活等局限性，從而限制了其臨床應(yīng)用。分子印跡聚合物（MIP），通常稱為塑料抗體，具有制備簡(jiǎn)單、成本低、穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn)，是生物親和試劑經(jīng)濟(jì)高效的替代品。

  為了合成對(duì)特定目標(biāo)物具有高親和力和選擇性的MIP，最佳單體配方的選擇至關(guān)重要。目前，研究者已開發(fā)出基于HPLC、流動(dòng)注射分析或酶聯(lián)免疫吸附等方法實(shí)現(xiàn)最佳配方的快速篩選。盡管取得了良好的效果，但合成的MIP顆粒的印跡位點(diǎn)具有類似于生物多克隆抗體的異質(zhì)性。

圖1. （a）BNP的氨基酸序列結(jié)構(gòu)；（b）通過將表位多肽固定在SMCC功能化的磁性納米顆粒上制備磁性模板的過程示意圖；（c）熒光FAM-MIP納米顆粒的合成過程；（d）MIP納米顆粒包裹碳量子點(diǎn)的合成過程；（e）熒光法檢測(cè)血清樣品中的BNP。

圖2. （a）magNP（b）magNP@SiO₂和（c）磁性模板（magNP-P）的SEM圖；（d）magNP@SiO₂ TEM圖；magNP，magNP@SiO₂，magNP@SiO₂-NH₂和magNP-P的（e）粒徑分布、（f）FTIR光譜、（g）XRD圖譜、（h）XPS元素分析、（i）Zeta電位和（j）VSM曲線。

圖3. （a-c）通過使用磁性模板和熒光FAM單體的競(jìng)爭(zhēng)熒光分析對(duì)MIP合成配方進(jìn)行組合篩選；（d-e）納米顆粒對(duì)干擾肽、BNP和干擾蛋白（HSA、BSA、Mb、OVA和BHb）的結(jié)合特異性。

圖5. 真實(shí)血清樣本的檢測(cè)結(jié)果

  與已報(bào)道的檢測(cè)方法相比，該方法的創(chuàng)新性和優(yōu)點(diǎn)包括：1）開發(fā)了一種基于固相印跡方法篩選合成含有均勻印跡位點(diǎn)的分子印跡人工抗體的新方法；2）利用低成本﹑高穩(wěn)定性的分子印跡人工抗體替代價(jià)格昂貴﹑易失活﹑不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)抗體；3）開發(fā)了一種可快速﹑準(zhǔn)確檢測(cè)BNP的新方法，該方法可在7分鐘內(nèi)完成對(duì)血清樣品中低濃度BNP的快速檢測(cè)，檢測(cè)方法具有高靈敏度和準(zhǔn)確性。

  原文鏈接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/adhm.202300146

通訊作者簡(jiǎn)介

呂永琴，北京化工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院教授，博士生導(dǎo)師，國(guó)家優(yōu)秀青年基金獲得者，北京市生物加工過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室副主任。主要在生物化工領(lǐng)域從事以下三個(gè)研究方向：(1) 限域微環(huán)境調(diào)控生物酶催化；(2) 光/電驅(qū)動(dòng)生物催化；(3) 仿生抗體工程及疾病診療。相關(guān)研究成果發(fā)表論文70余篇，申請(qǐng)發(fā)明專利二十余項(xiàng)。先后主持了國(guó)家、省部級(jí)及企業(yè)合作項(xiàng)目十余項(xiàng)。獲侯德榜化工科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)青年獎(jiǎng)、教育部自然科學(xué)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)、石油化工聯(lián)合會(huì)技術(shù)發(fā)明獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)等獎(jiǎng)項(xiàng)。