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  急性肺損傷（ALI）通常以呼吸窘迫、低氧血癥和炎癥的快速發(fā)作為特征，常由創(chuàng)傷、感染或全身性疾病引發(fā)。傳統(tǒng)治療方法主要依賴支持性護(hù)理如機(jī)械通氣和氧療，但這些方法存在局限性且無法精準(zhǔn)作用于損傷部位。盡管藥物治療仍是ALI治療的核心手段，但其臨床應(yīng)用常因副作用而受限。多酚類化合物因其抗氧化和抗炎特性備受關(guān)注，但其臨床應(yīng)用面臨重大挑戰(zhàn)，主要源于生物利用度低諸如口服吸收差、在胃腸道和肝臟中代謝迅速，導(dǎo)致體內(nèi)有效濃度降低。此外，環(huán)境因素（如pH值、溫度和酶解作用）易破壞多酚的穩(wěn)定性，進(jìn)一步削弱其療效。高劑量多酚還可能引發(fā)肝毒性、腎毒性或與其他藥物產(chǎn)生不良反應(yīng)。因此，設(shè)計(jì)合適的靶向載體以改善多酚類藥物的生物利用度與穩(wěn)定性，對(duì)最大化其在ALI治療中的潛力至關(guān)重要。

  為突破上述限制，微納米載藥系統(tǒng)的開發(fā)成為研究焦點(diǎn)。傳統(tǒng)微球制備技術(shù)（如溶劑揮發(fā)法、乳液聚合法）存在工藝缺陷如溶劑殘留、粒徑不均、載藥效率低及突釋效應(yīng)明顯。相比之下，電噴霧技術(shù)憑借精準(zhǔn)電場調(diào)控可制備粒徑均一、結(jié)構(gòu)可控的載藥微球，其低溫加工特性尤其適用于熱敏感藥物�；谕S電噴技術(shù)構(gòu)建的核殼微球，不僅能通過孔隙率調(diào)控實(shí)現(xiàn)長達(dá)數(shù)周的緩釋，還可利用表面功能化修飾（如纖連蛋白涂層）賦予病灶靶向能力，顯著提升肺部藥物蓄積效率。

  近年來，針對(duì)ALI中巨噬細(xì)胞極化失衡的關(guān)鍵機(jī)制，研究揭示生物活性蛋白（如纖連蛋白FN）可通過整合素信號(hào)通路驅(qū)動(dòng)M2型抗炎表型轉(zhuǎn)化，與多酚類藥物的抗氧化作用形成互補(bǔ)。這一發(fā)現(xiàn)為設(shè)計(jì)多功能納米載體提供了重要啟示：通過空間分隔負(fù)載不同活性成分（即核殼結(jié)構(gòu)），這種載藥方式既可避免分子間相互作用導(dǎo)致的失活，又能實(shí)現(xiàn)病灶部位的程序化釋放。此外，有效調(diào)控以TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎細(xì)胞因子過度分泌為特征的"細(xì)胞因子風(fēng)暴"，是炎癥性疾病治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。這些細(xì)胞因子的過量產(chǎn)生會(huì)加劇炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，可能導(dǎo)致多器官損傷或死亡。

圖1、RPG@FN微球的制備及其在ALI中的治療機(jī)制示意圖。

圖2、（A）以芘為熒光探針測定的PCL-PEG膠束臨界膠束濃度（CMC）。（B）游離Res、PCL-PEG/Res、RPG、RPG@BSA及RPG@FN的流體力學(xué)尺寸和（C）Zeta電位。（D）RPG@FN的掃描電鏡（SEM）圖像及（E）粒徑分布直方圖。（F）FN、RPG@FN、BSA、RPG@BSA和RPG的SDS-PAGE蛋白分析。（G）RPG@FN分散于水、PBS或含10%胎牛血清（FBS）的RPMI-1640培養(yǎng)基中不同時(shí)間段的流體力學(xué)尺寸變化。（H）RPG、RPG@BSA及RPG@FN在PBS中的Res累積釋放曲線。（I）RPG、RPG@BSA和RPG@FN于37 °C PBS中持續(xù)8周的體外降解曲線。圖（B）、（C）及（G-I）中實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次（n=3），"ns"表示無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

圖3 （A）不同濃度Res、PCL-PEG/Res及RPG@FN處理MH-S細(xì)胞24小時(shí)的活力（n = 6）。（B）PBS、FN或RPG@FN處理MH-S細(xì)胞12小時(shí)后的熒光強(qiáng)度及（C）定量分析（n = 3）。（D）RGD預(yù)封閉處理對(duì)RPG@FN靶向MH-S細(xì)胞的熒光強(qiáng)度影響定量分析（n = 3）；C-D圖中FN經(jīng)Cy5.5標(biāo)記。（E）不同材料處理12小時(shí)后，DCFH-DA探針檢測MH-S細(xì)胞活性氧（ROS）的熒光強(qiáng)度及（F）定量分析（n = 3）。（G）LPS激活的MH-S細(xì)胞與Res、FN、RPG@BSA或RPG@FN共孵育6小時(shí)，DCFH-DA染色后的共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM）圖像（標(biāo)尺：40 μm）。（H）JC-1熒光探針檢測不同材料處理下MH-S細(xì)胞線粒體膜電位（MMP）的流式細(xì)胞術(shù)分析。C-D及F圖中***表示p < 0.001。

圖4、（A）不同處理組MH-S細(xì)胞CD86與CD206表達(dá)水平的流式細(xì)胞術(shù)分析。（B）CD206陽性與（C）CD86陽性巨噬細(xì)胞比例統(tǒng)計(jì)。（D）TNF-α、（E）IL-6、（F）IL-1β及（G）IL-10在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平（24小時(shí)處理）。（H）細(xì)胞培養(yǎng)液中一氧化氮（NO）濃度檢測。（I）蛋白質(zhì)印跡（WB）分析不同處理組MH-S細(xì)胞中NF-κB與磷酸化Akt（p-Akt）的表達(dá)水平（I組：PBS；II組：LPS；III組：Res；IV組：FN；V組：RPG@BSA；VI組：RPG@FN）。圖（B-H）中實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次（n = 3），*表示p < 0.05，***表示p < 0.001。

圖5、（A）ALI小鼠體內(nèi)抗炎治療示意圖。（B）不同處理組ALI小鼠肺組織濕干重比。（C）各組小鼠肺組織中性粒細(xì)胞比例。（D）不同處理24小時(shí)后肺組織中性粒細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)點(diǎn)圖。（E-H）支氣管肺泡灌洗液（BALF）中促炎因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）與抗炎因子（IL-10）水平檢測。圖（B-C）及（E-H）中實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次（n = 3），**表示p < 0.01，***表示p < 0.001。

圖6、（A）通過免疫熒光染色評(píng)估不同處理組ALI小鼠肺組織巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)（藍(lán)色：DAPI核染色；綠色：M2型標(biāo)記物Arg-1；紅色：M1型標(biāo)記物iNOS）。（B）各組ALI小鼠肺組織活性氧（ROS）清除效果（標(biāo)尺：100 μm）。（C）肺組織H&E染色切片及（D）Micro-CT成像結(jié)果。圖C中紅色與黑色箭頭分別指示肺泡壁充血及炎癥細(xì)胞浸潤區(qū)域（標(biāo)尺：200 μm）。

  簡而言之，本研究采用同軸電噴技術(shù)開發(fā)了一種核殼結(jié)構(gòu)微球遞藥系統(tǒng)（RPG@FN），用于ALI的高效治療。該系統(tǒng)內(nèi)核由負(fù)載Res的PCL-PEG膠束構(gòu)成，外殼為PLGA材料，微球表面經(jīng)FN物理修飾。通過系統(tǒng)表征RPG@FN的粒徑形貌、穩(wěn)定性、藥物釋放及降解性能，證實(shí)其結(jié)構(gòu)完整性。體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了該體系在清除ROS、促進(jìn)M2型巨噬細(xì)胞極化、恢復(fù)線粒體膜電位及調(diào)控炎癥因子等方面的抗炎抗氧化活性。進(jìn)一步通過ALI小鼠模型體內(nèi)實(shí)驗(yàn)評(píng)估其治療效果。RPG@FN微球的優(yōu)勢主要源于以下三點(diǎn)：（1）基于電噴技術(shù)構(gòu)建的核殼微球以載藥膠束為內(nèi)核，可實(shí)現(xiàn)肺部長效緩釋；（2）顯著提升Res與FN的生物利用度，避免其降解失活；（3）FN修飾賦予微球炎癥巨噬細(xì)胞靶向性，通過ROS清除與M2極化雙重機(jī)制，協(xié)同恢復(fù)線粒體穩(wěn)態(tài)并阻斷NF-κB/PI3K-Akt信號(hào)通路。

  文章鏈接：https://doi.org/10.1016/j.jcis.2025.01.249