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  阿爾茨海默�。ˋD）是最常見的神經(jīng)退行性疾病之一，其特點是神經(jīng)元逐漸退化，導(dǎo)致認(rèn)知能力逐漸下降。隨著病情的發(fā)展，患者可能完全喪失生活自理能力，難以適應(yīng)周圍環(huán)境。AD的發(fā)病機制錯綜復(fù)雜，包括β-淀粉樣蛋白（Aβ）的異常聚集、激活的小膠質(zhì)細(xì)胞引發(fā)氧化應(yīng)激和神經(jīng)炎癥、神經(jīng)元功能障礙等，加上血腦屏障（BBB）帶來的巨大挑戰(zhàn)，極大地阻礙了治療藥物向病灶區(qū)域的有效輸送。目前的單藥療法只能針對AD發(fā)展過程中的特定方面，而在解決整個病理途徑的療效有限。尋求全面調(diào)節(jié)腦部炎癥微環(huán)境以有效改善AD病理的治療策略至關(guān)重要。

  自噬被廣泛認(rèn)為是一種自我保護機制，它能使細(xì)胞承受各種環(huán)境壓力，如營養(yǎng)或生長因子匱乏、缺氧、活性氧（ROS）或DNA損傷。加強細(xì)胞自噬以加速Aβ聚集體的分解和代謝被認(rèn)為是一種很有前景的治療策略，尤其是在神經(jīng)退行性疾病中。雷帕霉素（Rap）可通過調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞活性和減少促炎介質(zhì)的分泌，因而具有抗神經(jīng)炎和神經(jīng)保護特性。此外，Rap通過抑制mTOR活性促進自噬體形成，促使自噬體與溶酶體融合，形成自噬溶酶體，可有效清除神經(jīng)元細(xì)胞中受損或異常積累的蛋白質(zhì)，如Aβ和α-突觸核蛋白。

  納米平臺的開發(fā)為有效治療AD提供了新途徑。其中，羥基封端的含磷樹狀大分子不僅可以作為納米載體有效穿透BBB，實現(xiàn)大腦的靶向給藥，而且還表現(xiàn)出獨特的生物特性，如抗炎和免疫調(diào)節(jié)活性。這些樹狀大分子在發(fā)揮內(nèi)在生物活性的同時，還能抑制異常蛋白質(zhì)聚集，因而在治療神經(jīng)退行性疾病方面具有雙重潛力。與此同時，纖連蛋白（FN）通過抑制核因子卡巴-B（NF-κB）信號通路、減少促炎因子的表達以及促進巨噬細(xì)胞向M2表型轉(zhuǎn)化，表現(xiàn)出顯著的抗炎和抗氧化特性。FN在治療神經(jīng)退行性疾病方面大有可為，特別是由于其Arg-Gly-Asp(RGD)序列可促進其靶向小膠質(zhì)細(xì)胞表面整合素，增強其調(diào)節(jié)神經(jīng)炎癥和氧化應(yīng)激的能力。在近期的工作中，團隊構(gòu)建了亞磷酸鈉或羥基封端的含磷樹狀大分子/FN納米藥物，通過結(jié)合樹狀大分子自身的抗炎活性以及FN的抗炎抗氧化活性協(xié)同緩解巨噬細(xì)胞或小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激，促進M2分型，降低炎癥反應(yīng)，成功用于急性肺損傷/痛風(fēng)、缺血性腦卒中和帕金森病的抗炎/抗氧化治療（ACS Nano 2024, 18, 2195-2209; Adv. Healthcare Mater. 2024, 13, 2401462; Bioact. Mater. 2024, 38, 45-54）。

圖1. R@A/F NCs的合成及其用于AD的聯(lián)合治療示意圖。

圖2. （A）不同AK76/FN質(zhì)量比（1、2、4、6、8或10）下AK76、游離FN或A/F NCs的水動力學(xué)直徑和PDI以及（B）zeta電位。（C）AK76/FN質(zhì)量比為2時R@A/F NCs的TEM圖像和（D）尺寸分布直方圖。（E）SH-SY5Y和BV2細(xì)胞經(jīng)不同濃度AK76的R@A/F處理后的活力。（F）用PBS、游離FN-Cy5.5或A/F-Cy5.5 NCs處理BV2細(xì)胞后的相對熒光強度。（G）CLSM觀察用FN-Cy5.5或R@A/F-Cy5.5 NCs培養(yǎng)8小時后BV2細(xì)胞內(nèi)的熒光。（H）用多種抑制劑預(yù)處理后再用R@A/F-Cy5.5 NCs培養(yǎng)2小時的BV2細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)直方圖。

圖3.（A）WB檢測分析不同處理后Aβ處理的BV2細(xì)胞中P62和ATG5的蛋白表達水平。（B）P62蛋白相對表達量的定量分析。（C）CLSM檢測不同材料處理的Aβ挑戰(zhàn)的BV2細(xì)胞中MMP變化。（D）CLSM觀察不同處理后Aβ挑戰(zhàn)的BV2細(xì)胞中ROS的表達。（E）不同處理后Aβ挑戰(zhàn)的BV2細(xì)胞中ROS表達的平均熒光強度。（F）通過流式細(xì)胞術(shù)評估不同處理后Aβ挑戰(zhàn)的BV2細(xì)胞中CD86和CD206的表達水平。ELISA分析BV2細(xì)胞中（G）TNF-α、（H）IL-1β和（I）IL-6的分泌水平。（J）通過CLSM觀察分析不同處理后Aβ挑戰(zhàn)的BV2細(xì)胞中p-p65的相對表達水平。

圖5. （A）AD小鼠的治療和測試安排。（B）不同組別AD小鼠在NOR測試中的代表路徑。（C）根據(jù)（B）計算的識別指數(shù)量化。（D）不同組別小鼠在MWM測試中的游泳軌跡。紅點表示起點，黑點表示終點。（E）不同組小鼠在目標(biāo)象限內(nèi)的時間、（F）逃逸潛伏期和（G）穿越平臺的次數(shù)。

圖6.（A）不同組小鼠腦部Aβ、IBA-1/GFAP和ROS的免疫熒光圖像。（B）Aβ、（C）GFAP和（D）IBA-1在不同組中的相對表達量。（E）mTOR、ATG5和P62的WB表達分析。（F）不同處理后小鼠腦部CD86/CD206的免疫熒光染色。（G）不同組海馬區(qū)的H&E染色和神經(jīng)元的Nissl染色。

  簡而言之，該研究設(shè)計的納米藥物具有以下優(yōu)勢：（1）以含磷樹狀大分子為基礎(chǔ)的遞送系統(tǒng)顯著提高了FN和Rap的生物利用度，同時末端羥基賦予NCs穿透受損BBB的能力，通過FN介導(dǎo)靶向過表達α₄β₁整合素的小膠質(zhì)細(xì)胞，促進納米藥物靶向遞送至AD病變部位；（2）R@A/F NCs可協(xié)同AK76、FN和Rap的抗炎和抗氧化作用，促進氧化應(yīng)激緩解、線粒體功能恢復(fù)、自噬增強和誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞M2極化，從而協(xié)同抑制Aβ的聚集并改善AD認(rèn)知缺陷。所開發(fā)的納米藥物結(jié)合了生物活性含磷樹狀大分子和多組分藥物治療AD的優(yōu)勢，有望用于不同神經(jīng)退行性疾病的免疫調(diào)節(jié)治療。

  文章鏈接：https://doi.org/10.1016/j.nantod.2025.102664